世界著名流式抗体生产商,总部位于美国加州圣地亚哥,通过了 ISO 9001:2008 和 ISO 13485:2003 质量管理体系认证。提供1万余种涉及细胞免疫分型、细胞因子和趋化因子、黏附因子、癌症研究、T辅助细胞、Tfh、干细胞、天然免疫、细胞周期分析、凋亡等多个热点研究领域的二十余种荧光标记的流式抗体,2011年推出 BrilliantVioletTM系列抗体,7种荧光素千余种流式抗体,为您多色检测提供更多选择。另有多种体内、体外功能研究用的低内毒素、无叠氮钠的LEAFTM系列抗体,可提供定制服务。


CD4+/CD25+调节性T(Treg)细胞是现在免疫学领域研究的热门课题,Biolegend公司最新推出一系列人、小鼠和大鼠Treg细胞研究相关的标记抗体,成为研究Treg细胞有力的工具。

人Treg细胞相关抗体:CD3、CD4、CD8、CD25、CD28、CD45RO、CD150、CD184、FOXP3、GITR、GITRL、IL-10、T-bet;
小鼠Treg细胞相关抗体: CD3、CD4、CD8、CD25、CD28、CD150、CD152、FOXP3、GITR、GITRL、IL-10、T-bet;
大鼠Treg细胞相关抗体: CD3、CD4、CD8、CD25、FOXP3。
下面详细介绍重点推荐产品


一、Anti-mouse/rat/human FOXP3
FOXP3(Forkhead box protein P3)是一个50kD的转录因子,也称为Scurfin、JM2、IPEX。它是一个主要调节基因,也是调节性T细胞的特异性标志。CD4+/CD25-细胞上FOXP3的转录表达可以诱导GITR、CD103和CTLA4的表达,并且促使调节性T细胞表型形成。FOXP3在X连锁自身免疫-过敏失调综合征(XLAAD或IPEX)患者中发生突变。FOXP3过度表达会引起机体的免疫应答下降,表明它是一个调节T细胞活性的主要转录因子。由于FOXP3表达于细胞内,所以用流式染色时需要用胞内染色法。 
FOXP3标记抗体流式染色步骤:
1) 若同时做FOXP3和细胞表面抗原染色,则首先进行细胞表面染色。 
2) 每管加入1ml 1×Biolegend的FOXP3固定/破膜液(Cat.No.:421403),混匀,室温避光反应20min后,离心,弃上清。
3) 用细胞染色液(Cat.No.:420201)洗一次,1000rpm离心5min,弃上清。
4) 用1ml Biolegend的FOXP3破膜剂洗一次。
5) 用1ml Biolegend的FOXP3破膜剂重悬细胞,室温避光孵育15min,离心后弃上清;用100ul 1×Biolegend的FOXP3破膜剂重悬细胞。
6) 加入适量荧光标记的FOXP3抗体,室温避光反应30min。
7) 用细胞染色液洗两次,加入0.5ml细胞染色液重悬细胞,上流式细胞仪分析。
Biolegend公司提供的此类产品如下:


二、Anti-mouse GITR mAbs(抗小鼠GITR 单克隆抗体;克隆号:YGITR 765)
  YGITR 765单抗识别小鼠GITR。GITR即糖皮质激素诱导的TNFR相关基因,是TNF受体超家族中的成员,也被称为TNFRSF18、AITR(人类)。静止T细胞呈低水平表达GITR,而CD4+CD25+调节性T细胞则呈高水平表达;T细胞一旦激活则GITR的表达水平则会上调。GITR与其配体(GITRL)结合后会增强T细胞激活、增殖、分泌细胞因子、MAPKs和NF-κB激活效应、抑制CD4+CD25+ Treg细胞的功能。在体内实验中,GITR可引起自身免疫病,恢复受抑制的免疫应答。


三、Anti-mouse GITR Ligand mAbs(抗小鼠GITR配体单克隆抗体;克隆号:YGL386)
  YGL386单抗识别小鼠GITR配体。GITRL是TNF超家族的成员,也被称为TNFSF18、TL6。B细胞、巨噬细胞、树突状细胞和内皮细胞表达GITRL;LPS刺激树突状细胞后,其表面的GITRL表达先有短暂的上调,而后则会快速下调。GITRL与其受体GITR结合后,可以刺激T细胞激活、增殖和分泌细胞因子;抑制CD4+CD25+ Treg细胞的功能;诱导巨噬细胞激活。GITR-GITRL的相互作用还是机体对自身抗原和病原体免疫反应重要的调节子。

 


四、Human Treg FlowTM Kit(FOXP3/CD25/CD4三色抗体试剂盒)
  调节性T(Treg)细胞是一群表达特征为CD4+/CD25+/FOXP3+的T淋巴细胞,Treg细胞来源于胸腺,占外周血CD4+ T细胞的2-10%。据报道,Treg细胞可以抑制T细胞增殖和分泌细胞因子,在防止发生自身免疫、控制肿瘤免疫和移植耐受方面发挥重要作用。Treg细胞缺陷或功能受损会引发很多自身免疫病,而Treg细胞增多则会抑制机体对病原体的免疫应答反应,所以Treg细胞是一群重要的免疫调节细胞,在调节机体免疫应答中起着不可或缺的作用。
  Biolegend公司的Human Treg FlowTM Kit由三种荧光标记的CD4、CD25和FOXP3抗体及相关缓冲液组成,可特异性地鉴定出Treg细胞,简单方便。
试剂盒组分:
1) Alexa Fluor® 488标记的抗人FOXP3(25 tests)
2) Alexa Fluor® 488标记的小鼠IgG1,κ同型对照(25 tests)
3) FOXP3固定/破膜液和FOXP3破膜剂(100 tests)
4) 抗人CD4 PE-Cy5/CD25 PE双色抗体(50 tests)

 

五、Anti-human FOXP3 mAbs(抗人FOXP3 单克隆抗体;克隆号:206D和259D)
  FOXP3(Forkhead box protein P3)是一个50kD的转录因子,也称为Scurfin、JM2、IPEX。它是一个主要调节基因,是调节性T细胞的特异性标志。CD4+/CD25-细胞上FOXP3的表达可以诱导GITR、CD103和CTLA4的表达,并且促使调节性T细胞表型形成。FOXP3在X连锁自身免疫-过敏失调综合征(XLAAD或IPEX)患者中发生突变。FOXP3过度表达会引起免疫反应下降,表明它是一个主要调节调节性T细胞活性的转录因子。
  抗人FOXP3抗体(克隆号:206D)可用于流式细胞术、Western Blotting、IHC(冰冻/石蜡切片)。 

Biolegend提供的此类产品有:

六、Biolegend公司最新推出的其他热门产品
1、Anti-Mouse CCR7 (CD197) monoclonal antibody:(抗小鼠CCR7单克隆抗体
  小鼠CD197,即C-C趋化因子受体7(CCR7)或EBI-1,是GPCR超家族中的一个43kD的G蛋白偶联-视紫质样的成员。造血干细胞、大多数幼稚T细胞、部分记忆性T细胞、部分B细胞和成熟树突细胞表达CCR7。CCR7是趋化因子CCL19(MIP3,β)和SLC(6Ckine、 Exodus-2、TCA-4、CCL21)的受体,在胸腺细胞发育、肠道中的T细胞黏附、记忆性T细胞的自身再循环和趋化过程中有重要意义。
  抗小鼠CCR7单抗(克隆号:4B12)识别CD197,可用于流式细胞术和免疫沉淀实验。


2、Alexa Fluor® 488、 Alexa Fluor® 647和Pacific Blue™标记抗体 
  Biolegend有几种独特的标记染料,这些染料与常规的染料相比具有明显的优势:荧光信号强;对光的稳定性强。
  Alexa Fluor® 488 Dye:与FITC、FAM有相似的光谱特性,但每个蛋白结合的荧光素的荧光强度更高。用Alexa Fluor® 488标记的流式抗体的荧光信号很强,可用于检测微量的受体和其他蛋白标本。Alexa Fluor® 488对光耐受性强,比FITC更稳定,可以允许荧光显微成像中观察、捕获荧光信号的时间更长。
  Alexa Fluor® 647 Dye:与APC、Cy5有相似的光谱特性,可以作为其替代品用于流式抗体的荧光标记。但与Cy5相比,Alexa Fluor® 647标记抗体的荧光信号强度是Cy5的3-4倍,因此更适宜于检测微量受体或蛋白的多色流式细胞术。此外,Alexa Fluor® 647对光的耐受性较强,可用于荧光显微镜检测。
  Pacific Blue® Dye:在发射光为460nm处发出亮蓝色荧光,与Cascade Yellow有相似的光谱特性,但对光的稳定性更强。Pacific Blue™ 标记抗体在荧光显微镜和多色流式细胞术中最好用氪离子激光管或405nm蓝色双二极管进行激发。