做试验要检测3种以上细胞因子或趋化因子?还在一块ELISA板接着一块做?费时又费力。还在苦于ELISA检测多种指标时,样品宝贵,体积太少,检测不够用吗?还是纠结于现有多因子检测价格太高?找我们Biolegend推出的LEGENDplex多因子检测试剂盒,最少只需12.5μL25μL的样本量,便可以同时检测13种指标,方便省时,性价比高,为您提供多种细胞因子同时检测的优选解决方案。

LEGENDplex 多因子检测原理

Biolegend LEGENDplex 是基于荧光微球技术的免疫“双夹心”液相检测方法,反应原理类似于ELISA检测。13微球各自具有不同强度荧光(APC),并依大小分为AB两类,分别为6种和7种。微球分别耦连对应指标的捕获抗体,可捕获样品中或标准品中的目标蛋白,经过孵育和洗涤,与加入的检测抗体形成“双抗夹心”的三明治结构,再与加入的链霉亲和素-PESA-PE)反应,最后通过检测流式细胞仪PEAPC通道的信号强度,分别定性微球和定量分析物,并借助厂家提供的免费软件对数据进行分析。

LEGENDplex 的特点:

1)可用于市面多数流式细胞仪

2)预设panelsTh1/2/17等)、自选 panels 及定制服务可选

3)免费的数据分析软件

4)性价比高,单反应价格低于同类产品

5)操作灵活,可在96孔板、EP管和真空吸滤板进行反应


试剂盒组成

试剂盒内包含荧光微球(预混或单独包装)、生物素标记的检测抗体PE荧光素偶联的链霉亲和素标记、Assay Buffer Washing Buffer缓冲液,以及96孔可真空抽吸板、dongle

检测灵敏度

应用人类辅助性T细胞因子检测试剂盒分析细胞上清和血浆内的细胞因子为例(Human T Helper Cytokine PanelsCat. No.740001

在生物研究领域中的应用

人外周血单核细胞(PBMC)分别用LPSCD3/CD28刺激2d4d时间13细胞因子的表达量(浓度单位:pg/ml)。


常见问题解答(一)

QLEGENDplex 方法适用的流式细胞仪有哪些?

A可用于绝大多数流式细胞仪,如BD  FACSCalibur™ ,BD  FACSCanto™ ,BD  FACSCanto™  IIBDLSR™  BD  LSR™ II, BD  LSRFortessa™ , BD  FACSAria™  I、 II 和 III ,请参照说明书的“终端用户需要准备的材料( Materials  to  be  provided  by  end-user )”部分,了解对仪器和通道配置的要求。对于其他品牌流式仪( Beckman  Coulter、 Guava 等),使用时需要合理设置仪器参数。

QLEGENDplex Luminex®两种实验方法有什么不同之处?

ALEGENDplex Luminex®都是基于荧光微球技术,通过形成“双抗夹心”的三明治结构,来检测样本中多种指标含量的免疫学实验方法。它们之间最大的不同是数据的收集方式,  LEGENDplex 通过流式细胞仪完成数据的收集,而Luminex®是通过专门的仪器完成数据收集。相对Luminex®仪器来说,流式细胞仪的分布和使用更加普遍。只要实验室有可以利用的流式细胞仪,就能开展LEGENDplex 多因子检测实验。LEGENDplex 也不能在Luminex®的仪器上进行数据收集。

Q:厂家提供的免费分析软件是否对数据格式有要求?

A只要流式细胞仪完成数据收集后能够生成FCS文件格式,通常是FCS2.03.03.1就可以用  LEGENDplex™ 分析软件进行分析(软件下载网址:Biolegend.com/legendplex/software)。目前版本的软件只能在安装Windows 7Windows 8 (32位或64)系统的电脑上运行,与XPMac系统兼容的版本还在开发中。如果流式细胞仪连接的是Mac系统,需要在数据收集完成后将所有的原始数据(FCS文件)转移到个人电脑上再进行分析。